草鱼出血病病毒VP6蛋白的原核表达、纯化及免疫效果 Prokaryotic expression, purification and immune effic

排行榜 收藏 打印 发给朋友 举报 来源: 《水产学报》 发布者:cjk3d
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摘要:为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV) VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6.SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500 μg肌肉注射免疫草鱼(14~20 cm,60 ~120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫注射第21天人工接种GCRV,免疫后的草鱼对出血病的保护力达100%.

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a.Ea5CGR#ymUKi@1O0刘林[1] 徐诗英[2] 李婧慧[3] 邹勇[3] 倪金俤[3] 杨鸢劼[3] 曹广力[1] 薛仁宇[1] 陈辉[3] 贡成良[1]

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作者单位:

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苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京210036;南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京,210036水利论文1@$I jWO;X

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草鱼出血病病毒 VP6蛋白 原核表达载体 柱纯化 免疫效果 grass carp 重组蛋白 免疫注射 Western-blotting 免疫保护作用 可检测 特异性抗体 亚单位疫苗 注射免疫 重组质粒 人工接种 抗体水平 反应检测 vp6基因 pET-28a

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