以重复序列为靶位点的鳜鱼多位点基因打靶载体的构建 Construction of vector of multiple locus gene targetin

排行榜 收藏 打印 发给朋友 举报 来源: 《中国水产科学》 发布者:cjk3d
热度8票 浏览6次 【共0条评论】【我要评论 时间:2005年12月06日 14:08
以重复序列为靶位点的鳜鱼多位点基因打靶载体的构建

Construction of vector of multiple locus gene targeting on repetitive sequences of Siniperca chuatsi

以鳜鱼(Siniperca chuatsi)为研究对象,以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点构建多位点基因打靶载体,为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料.先构建含TK和Neo基因的通用打靶载体pCTKNeo.采用LA Taq高保真酶扩增获得左、右同源重组引导臂HRDS1、HRDS2,经T质粒克隆后,分别插入到pCTKNeo载体Neo基因的上下游,构建成鳜鱼专用的多位点打靶载体pCTKNeo-HRDS1/2.同样将干扰素基因hIFN插入到pCTKNeo-HRDS1/2载体的Neo基因与HDRS2之间.每次克隆均经PCR、酶切和测序等鉴定DNA片段的插入及插入方向,最终构建成多位点基因打靶载体pCTKNeo-HRDS1/2-hIFN.目前的基因打靶技术存在打靶效率低、安全性等问题,以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技术将部分解决这些问题.水利论文S5MVU9\/E

作 者: 唐冬生 严霞 李芳 张细权 蒋泓 于辉 高东 李月琴 周天鸿 TANG Dong-sheng YAN Xia LI Fang ZHANG Xi-quan JIANG Hong YU Hui GAO Dong LI Yue-qin ZHOU Tian-hong  
作者单位:唐冬生,TANG Dong-sheng(佛山大学,生命科学学院,广东,佛山,528000;暨南大学,生命科学与技术学院,广东,广州,510632)
H(ZG_k)R0严霞,李芳,于辉,高东,YAN Xia,LI Fang,YU Hui,GAO Dong(佛山大学,生命科学学院,广东,佛山,528000)水利论文 I.pOe)Q:D.[1S
张细权,ZHANG Xi-quan(华南农业大学,动物科学学院,广东,广州,510642)水利论文 a3x_A{2l1YiY_.G
蒋泓,李月琴,周天鸿,JIANG Hong,LI Yue-qin,ZHOU Tian-hong(暨南大学,生命科学与技术学院,广东,广州,510632) 
刊 名:中国水产科学  ISTIC PKU
英文刊名:JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 
年,卷(期):2005 12(4) 
分类号:Q786 
关键词:基因打靶   多基因座   载体   重复序列   鳜鱼  
机标关键词:重复序列靶位点鳜鱼多位点基因打靶靶载体构建Siniperca chuatsi技术获得质粒克隆研究对象同源重组间隔序列关键材料高保真干扰素部分解靶效率安全性下游 
基金项目:国家自然科学基金,广东省自然科学基金 
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